在液相色譜（LC）的日常使用中，“堵” 和 “漏” 是最常見的兩大 “病癥”—— 它們不僅會導致儀器壓力異常、基線波動、保留時間漂移，嚴重時還會損壞核心部件（如泵、色譜柱），影響實驗結果的準確性。要解決這兩個問題，需先明確 “堵” 和 “漏” 的常見位置、成因，再針對性排查處理。
一、“堵”：流路不暢的核心問題
“堵” 本質是液相色譜流路中（如管道、色譜柱、閥門等）出現固體雜質或析出物，導致流動相無法順暢通過，表現為系統壓力異常升高（如突然超過正常壓力上限）、流量不穩定，甚至完全斷流。
1. 常見 “堵點” 及成因
液相色譜的流路從 “流動相瓶” 到 “檢測器出口” 是連貫的，“堵點” 多集中在易截留雜質或易析出物質的部位：
溶劑過濾器（吸濾頭）：直接接觸流動相，若流動相未過濾、瓶中有沉淀（如緩沖鹽結晶），或長期使用后吸附了微生物 / 顆粒物，會堵塞濾頭孔隙。
單向閥：控制流動相單向流動的核心部件，內部有寶石球和閥座。若流動相中含微小顆粒，會卡住寶石球；若緩沖鹽在閥內析出，會導致密封不嚴，間接引發 “假性堵塞”（壓力波動）。
進樣閥：進樣時樣品直接通過，若樣品未過濾（含顆粒物）、進樣量過大導致過載，或樣品中的高濃度鹽 / 有機物在閥內殘留析出，會堵塞定量環或轉子密封槽。
色譜柱：最核心的分離部件，固定相（如 C18 硅膠）的孔徑僅幾微米到幾十納米。若樣品含顆粒物、未去除蛋白 / 油脂等大分子，或流動相中的鹽在柱內析出，會堵塞固定相孔隙，甚至導致柱頭塌陷。
檢測器流通池：孔徑極小（通常 < 1mm），若前序流路的雜質未被截留（如色譜柱柱頭塌陷后漏出的填料），會直接堵塞流通池，導致壓力驟升。
2. “堵” 的解決與排查步驟
解決 “堵” 的核心是 “定位堵點→清除堵塞物→預防再次堵塞”，可按以下步驟排查：
第一步：定位堵點
通過分段測試壓力判斷：關閉泵，斷開某部件（如先斷開色譜柱，僅測試 “泵→進樣閥→檢測器” 的壓力；再斷開檢測器，測試 “泵→進樣閥” 的壓力），對比各段壓力是否正常（正常壓力范圍需結合儀器型號，如常規分析柱系統正常壓力多在 5-20 MPa）。
若斷開色譜柱后壓力恢復正常：堵點在色譜柱或其后的流路（如檢測器）。
若斷開進樣閥后壓力恢復正常：堵點在進樣閥或之前的流路（如單向閥、溶劑過濾器）。
第二步：針對性處理 “堵點”
溶劑過濾器堵塞：取下濾頭，用 30% 硝酸浸泡 1 小時（去除金屬雜質）或甲醇超聲 15 分鐘（去除有機物），蒸餾水沖洗后晾干；若堵塞嚴重（如濾頭變色、孔隙完全堵死），直接更換新濾頭。
單向閥堵塞：拆開單向閥（需按儀器說明書操作），用甲醇或異丙醇超聲清洗寶石球和閥座（去除顆粒物）；若有鹽析出，可用熱水超聲（溶解鹽類）；若寶石球或閥座磨損（如卡頓無法復位），需更換單向閥。
進樣閥堵塞：用 “洗針液”（如甲醇 - 水）反復沖洗定量環，或手動進樣 “強溶劑”（如純甲醇）沖洗；若轉子密封槽堵塞，可在儀器上執行 “閥清洗程序”（大流量沖洗密封面）；若堵塞物為鹽，可用熱水沖洗。
色譜柱堵塞：先嘗試 “反沖”（將色譜柱反向連接，用低流速純溶劑沖洗柱頭，如 C18 柱用純甲醇），去除柱頭殘留的顆粒物；若反沖無效，可挖去柱頭最上層 1-2mm 的污染填料（需專業操作，避免破壞柱床）；若柱效已嚴重下降（如理論塔板數驟降），需更換新柱。
檢測器流通池堵塞：斷開流通池，用注射器注入甲醇或熱水（針對鹽堵）緩慢沖洗；若堵塞嚴重，需聯系廠家更換流通池。
3. “堵” 的預防：比處理更重要
“堵” 的核心是 “雜質進入流路”，預防需從源頭控制：
流動相預處理：所有流動相（包括水、有機溶劑、緩沖鹽）必須經 0.45μm 濾膜過濾（水相 / 緩沖鹽用水系濾膜，有機相用有機系濾膜）；緩沖鹽溶液需現配現用，避免長期放置析出結晶；含易滋生微生物的流動相（如純水相）需添加防腐劑（如 0.01% 疊氮化鈉）。
樣品預處理：樣品需經離心（12000rpm，10 分鐘）或 0.22μm 濾膜過濾（去除顆粒物）；含蛋白、油脂等大分子的樣品，需先經固相萃取（SPE）或蛋白沉淀處理，避免污染色譜柱。
日常維護：
每次實驗結束后，用純溶劑（如甲醇）沖洗系統 30 分鐘以上（尤其用了緩沖鹽后，需徹底沖洗殘留鹽，避免析出）；
長期不用儀器時，溶劑過濾器需浸泡在甲醇中（避免微生物滋生）；
定期（如每月）檢查單向閥、溶劑過濾器狀態，及時清洗或更換。
二、“漏”：密封失效的典型表現
“漏” 是流動相從流路的密封部位（如接頭、密封圈）滲出，表現為儀器表面有液滴、系統壓力異常降低（如壓力驟降且流量不足）、基線噪音增大（漏液進入檢測器光路），嚴重時會導致流動相浪費、實驗環境污染，甚至損壞電路部件。
1. 常見 “漏點” 及成因
“漏” 的核心是密封部件失效，常見漏點集中在 “需要拆卸連接” 或 “長期摩擦 / 受壓” 的部位：
管路接頭：最常見漏點。若接頭未擰緊（力度不足）、過度擰緊（導致螺紋滑絲），或接頭 / 管路內壁有劃痕（如多次拆卸磨損），會導致密封不嚴。
泵密封圈（柱塞桿密封）：泵的柱塞桿反復運動，密封圈長期摩擦會老化、磨損；若流動相含顆粒物，會加速密封圈劃傷，導致流動相從柱塞桿與密封圈的縫隙漏出。
進樣閥密封圈（轉子密封）：進樣閥的轉子與定子長期旋轉摩擦，或樣品中的強腐蝕性物質（如強酸、強堿）侵蝕密封圈，會導致密封失效，漏液從進樣口或廢液口滲出。
色譜柱接口：色譜柱兩端的接頭若未與儀器管路對齊（如角度偏差）、接口磨損，或柱端篩板松動（如反沖時壓力過大），會導致漏液。
檢測器出口：若檢測器流通池出口管路堵塞（如之前的 “堵” 未解決），壓力過高會頂開出口接頭，導致漏液。
2. “漏” 的解決與排查步驟
解決 “漏” 需先找到漏點（肉眼觀察或用濾紙排查），再根據漏點類型處理：
第一步：定位漏點
開機后觀察儀器表面，重點檢查：接頭連接處（用濾紙擦拭，若濾紙變濕則為漏點）、泵的柱塞桿附近（是否有液滴）、進樣閥廢液管（是否漏液）、色譜柱兩端接口（是否有結晶或液痕）。
第二步：針對性處理 “漏點”
管路接頭漏液：先關閉泵，松開接頭后重新對齊（確保管路與接頭同軸），再用手輕輕擰緊（液相接頭多為 “手緊 + 半圈”，避免用工具過度擰緊）；若接頭磨損（如螺紋滑絲），直接更換新接頭。
泵密封圈漏液：若漏液輕微，可先檢查流動相是否潔凈（避免顆粒物磨損）；若漏液嚴重（如柱塞桿有明顯液痕），需按說明書更換密封圈（注意型號匹配，如 PEEK 材質耐有機溶劑，PTFE 材質耐酸堿）。
進樣閥轉子漏液：執行 “閥清洗” 程序，去除殘留污染物；若漏液持續，說明密封圈老化，需更換轉子密封組件（更換時注意清潔，避免雜質進入）。
色譜柱接口漏液：重新對齊色譜柱與管路接口，輕輕擰緊；若柱端篩板松動，需聯系廠家維修（不可自行拆卸）；若接口磨損，更換色譜柱接頭。
檢測器出口漏液：先排查是否因流通池堵塞導致壓力過高（參考 “堵” 的處理），疏通后再重新擰緊出口接頭。
3. “漏” 的預防：減少密封部件損耗
規范操作連接部件：安裝接頭時確保 “對齊同軸”（避免角度偏差導致磨損），擰緊力度以 “不漏液” 為原則（無需過度用力）；拆卸時用專用工具（如扳手），避免徒手硬擰。
避免腐蝕性物質損傷：若樣品 / 流動相含強酸、強堿或強有機溶劑（如二氯甲烷），需選擇耐腐蝕性密封圈（如 PEEK 材質），并縮短實驗后沖洗時間（及時用中性溶劑沖洗）。
定期更換易損件：密封圈、轉子密封等屬于消耗品，需根據使用頻率定期更換（如常規實驗每 3-6 個月檢查一次，高頻使用每月檢查）。
總結：“堵” 和 “漏” 的核心應對邏輯
堵：防大于治—— 通過 “過濾（流動相、樣品）、清洗（實驗后及時沖系統）、避免鹽析出（不用時用純溶劑保存）” 減少雜質進入流路，從源頭降低堵塞風險。
漏：規范 + 維護—— 通過 “正確連接、避免過度用力、定期更換易損件” 保護密封部件，發現漏液及時處理（避免壓力異常加劇磨損）。
掌握這兩大 “病癥” 的排查邏輯后，日常使用中可通過 “壓力監測（堵）” 和 “目視檢查（漏）” 提前預警，將故障解決在萌芽階段，既能延長儀器壽命，也能保證實驗結果的
